O que «5 mg» significa realmente num frasco de péptido
O rótulo indica a massa bruta de liofilizado. Contra-iões e água residual fazem parte dela, e o cálculo vale a pena fazer-se uma vez.
Um frasco rotulado como 5 mg não contém 5 mg de péptido. Não é um truque nem algo próprio de um fornecedor — é consequência de como os péptidos são fabricados e como os frascos são cheios, e o cálculo vale a pena fazer-se uma vez.
A que se refere o número do rótulo
A quantidade indicada é a massa bruta de liofilizado — a massa total de sólido no frasco. Esse sólido não é péptido puro. Contém, por ordem decrescente:
- O próprio péptido
- Contra-iões, normalmente trifluoroacetato da purificação. Tipicamente 5 a 20 % em massa, aumentando com o número de resíduos básicos da sequência
- Água residual, alguns por cento mesmo após secagem cuidada
- Vestígios de solvente residual
A fração que é realmente péptido chama-se teor de péptido, e num péptido de investigação típico situa-se entre 75 e 90 por cento.
O cálculo
Tomemos um frasco de 5 mg com 99 % de pureza por HPLC e 82 % de teor de péptido:
- Liofilizado bruto: 5,0 mg
- Péptido presente: 5,0 × 0,82 = 4,1 mg
- Desse, o péptido correto: 4,1 × 0,99 = 4,06 mg
O valor de 99 % de pureza é exato e o rótulo é exato. Simplesmente respondem a perguntas diferentes — a pureza pergunta que fração do péptido presente é o correto; o teor, que fração da massa do frasco é péptido.
Quando importa e quando não
Para trabalho qualitativo — se o composto faz sequer o que se espera — uma diferença de dez a vinte por cento na massa real raramente muda a conclusão.
Para trabalho quantitativo — curvas dose-resposta, determinações de IC50, tudo o que tenha a concentração como variável medida — é um erro sistemático exatamente dessa dimensão aplicado a cada ponto. Não se dilui com réplicas nem será visível nos dados.
Se a exatidão da concentração importa, pedir o teor de péptido. Vem de um ensaio à parte — análise de aminoácidos ou determinação de azoto — que nem todos os fornecedores encomendam. Se conseguem responder já é informativo.
Tolerância de enchimento
Uma segunda fonte de variação, menor. Os frascos são cheios por massa ou por volume de solução antes da liofilização, e nenhum dos dois é exato. Tolerâncias de alguns por cento são normais e não são defeito.
Na prática, um frasco rotulado como 5 mg pode conter 4,9 ou 5,1 mg de liofilizado antes sequer de qualquer cálculo de teor. Para a maioria do trabalho é desprezável; para o mais rigoroso, a resposta é pesar, e pesar exige uma balança analítica e manuseamento a seco, não um rótulo.
Comparar fornecedores como deve ser
O preço por frasco é uma comparação quase sem sentido. Dois frascos de 10 mg ao mesmo preço são produtos diferentes se um tiver 90 % de péptido e o outro 75 %.
A grandeza comparável é o custo por miligrama de péptido:
custo por mg de péptido = preço ÷ (massa do frasco × teor de péptido × pureza)A maioria dos fornecedores não publica o teor de péptido, o que significa que na maioria das comparações se trabalha com dois dos três números. Vale a pena sabê-lo e não contorná-lo — e é mais uma razão pela qual a disponibilidade para responder a uma pergunta analítica concreta separa os fornecedores com mais fiabilidade do que os seus sites.
O nosso artigo sobre teor versus pureza detalha a distinção, o artigo sobre contra-iões de onde vem a massa adicional, e o artigo sobre preços o que determina o custo.
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