Qué significa realmente «5 mg» en un vial de péptido
La etiqueta indica la masa bruta de liofilizado. Contraiones y agua residual forman parte de ella, y el cálculo merece hacerse una vez.
Un vial etiquetado como 5 mg no contiene 5 mg de péptido. No es un truco ni algo propio de un proveedor: es consecuencia de cómo se fabrican los péptidos y cómo se llenan los viales, y el cálculo merece hacerse una vez.
A qué se refiere la cifra de la etiqueta
La cantidad indicada es la masa bruta de liofilizado: la masa total de sólido en el vial. Ese sólido no es péptido puro. Contiene, en orden decreciente:
- El propio péptido
- Contraiones, normalmente trifluoroacetato procedente de la purificación. Habitualmente del 5 al 20 % en masa, y aumenta con el número de residuos básicos de la secuencia
- Agua residual, un pequeño porcentaje incluso tras un secado cuidadoso
- Trazas de disolvente residual
La fracción que es realmente péptido se llama contenido de péptido, y en un péptido de investigación típico está entre el 75 y el 90 por ciento.
El cálculo
Tomemos un vial de 5 mg con 99 % de pureza por HPLC y 82 % de contenido de péptido:
- Liofilizado bruto: 5,0 mg
- Péptido presente: 5,0 × 0,82 = 4,1 mg
- De ese, el péptido correcto: 4,1 × 0,99 = 4,06 mg
La cifra de 99 % de pureza es exacta y la etiqueta es exacta. Simplemente responden a preguntas distintas: la pureza pregunta qué fracción del péptido presente es el correcto; el contenido, qué fracción de la masa del vial es péptido.
Cuándo importa y cuándo no
Para trabajo cualitativo —si el compuesto hace lo que debe— una diferencia del diez al veinte por ciento en la masa real rara vez cambia la conclusión.
Para trabajo cuantitativo —curvas dosis-respuesta, determinaciones de IC50, cualquier cosa donde la concentración sea la variable medida— es un error sistemático exactamente de ese tamaño aplicado a cada punto. No se promedia con las réplicas ni se verá en los datos.
Si la exactitud de la concentración importa, pedir el contenido de péptido. Procede de un ensayo aparte —análisis de aminoácidos o determinación de nitrógeno— que no todos los proveedores encargan. Que puedan responder ya es informativo.
Tolerancia de llenado
Una segunda fuente de variación, menor. Los viales se llenan por masa o por volumen de disolución antes de la liofilización, y ninguna de las dos es exacta. Tolerancias de un pequeño porcentaje son normales y no son un defecto.
En la práctica, un vial etiquetado como 5 mg puede contener 4,9 o 5,1 mg de liofilizado antes incluso de aplicar el cálculo de contenido. Para la mayoría del trabajo es despreciable; para el más preciso, la respuesta es pesar, y pesar exige una balanza analítica y manipulación en seco, no una etiqueta.
Comparar proveedores como es debido
El precio por vial es una comparación casi carente de sentido. Dos viales de 10 mg al mismo precio son productos distintos si uno tiene 90 % de péptido y el otro 75 %.
La magnitud comparable es el coste por miligramo de péptido:
coste por mg de péptido = precio ÷ (masa del vial × contenido de péptido × pureza)La mayoría de proveedores no publica el contenido de péptido, lo que significa que en casi todas las comparaciones se trabaja con dos de los tres números. Conviene saberlo, no rodearlo, y es otra razón por la que la disposición a responder a una pregunta analítica concreta separa a los proveedores con más fiabilidad que sus webs.
Nuestro artículo sobre contenido frente a pureza detalla la distinción, el artículo sobre contraiones de dónde viene la masa extra, y el artículo sobre precios qué determina el coste.
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