Tirzepatido: como um péptido ativa dois recetores
Uma sequência de 39 resíduos concebida a partir do esqueleto do GIP para ligar dois recetores distintos, com um diácido gordo para sobreviver à eliminação renal.
O tirzepatido é um péptido sintético de 39 resíduos que atua em dois recetores — GIP e GLP-1 — em vez de um. A química interessante está em como uma única sequência foi concebida para o conseguir, porque o agonismo duplo não surge por acaso.
O problema de conceção
GIP e GLP-1 são péptidos incretina e ambos pertencem à superfamília do glucagom, pelo que partilham características estruturais. Não são, contudo, intercambiáveis: cada um tem o seu recetor com as suas preferências de ligação.
Construir uma molécula que ative ambos implica encontrar uma sequência suficientemente próxima de cada ligando nativo para ligar o seu recetor, sem ser nenhum dos dois. A abordagem escolhida partiu do esqueleto do GIP e substituiu resíduos nas posições onde o GLP-1 difere e onde o recetor do GLP-1 é tolerante.
As modificações
- Ácido α-aminoisobutírico nas posições 2 e 13. O Aib na posição 2 bloqueia a dipeptidil peptidase-4, a mesma solução do semaglutido. O Aib favorece também fortemente a hélice — os seus dois grupos alfa-metilo restringem a rotação do esqueleto — pelo que o segundo Aib estabiliza a conformação helicoidal que ambos os recetores reconhecem.
- Um diácido gordo C20 em Lys20, ligado através de ácido γ-glutâmico e duas unidades AEEA. Tal como no semaglutido, liga-se reversivelmente à albumina sérica, protege o péptido da eliminação renal e produz uma semivida em dias e não em minutos.
- Amidação C-terminal, que elimina o carboxilato livre e bloqueia as carboxipeptidases.
- Substituições de sequência nas posições onde os requisitos dos recetores GIP e GLP-1 divergem, ajustando o equilíbrio de atividade entre ambos.
A massa molecular é de cerca de 4813 g/mol.
Porque é analiticamente exigente
Trinta e nove resíduos, dois aminoácidos não proteinogénicos, uma conjugação de cadeia lateral em vários passos e uma amidação C-terminal. Cada um é um ponto em que a síntese pode ficar incompleta.
| O que pode correr mal | O que o deteta |
|---|---|
| Resíduo em falta (sequência de deleção) | Espetrometria de massa — a HPLC muitas vezes não resolve |
| Acilação incompleta ou ausente | Espetrometria de massa — grande diferença de massa |
| Ácido livre em vez de amida C-terminal | Espetrometria de massa — +1 Da |
| Subprodutos de síntese muito próximos | Integração de áreas de pico por HPLC |
A conclusão prática é que, numa molécula desta complexidade, um valor de pureza sem confirmação de massa é quase desprovido de significado. A HPLC diz quanto existe de uma coisa; não diz que essa coisa é o que a etiqueta afirma.
Manuseamento
A cadeia lateral lipídica torna o tirzepatido anfifílico, pelo que é mais propenso do que um péptido hidrofílico simples a adsorver a superfícies e a desdobrar-se em interfaces ar-líquido. Reconstituir encaminhando o solvente pela parede do frasco, rodar suavemente, nunca sacudir nem vortexar, e usar tubos de baixa adsorção em soluções diluídas. Refrigerar após a reconstituição e alicotar em vez de congelar e descongelar.
O nosso guia de reconstituição e a nota sobre agregação detalham a técnica.
O tirzepatido é fornecido estritamente para investigação laboratorial. Não fornecemos informação de posologia e nada aqui descreve uso em humanos. Cada lote é analisado por um laboratório independente, com certificados associados ao lote mediante pedido.
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